Фермент- гидролизуемая эфирная связь

1. фосфолипаза А1	А. удаляет жирную кислоту у С1 глицерина
2. фосфолипаза С	Б. удаляет жирную кислоту у С2 глицерина
3. фосфолипаза А2	В. гидролизует эфирную связь у С3 глицерина
4. фосфолипаза D	Г. высвобождает фосфатидную кислоту

Задание 3. Подберите сочетания правильных ответов.

3.1. Биохимические функции ЛХАТ:

1. катализирует реакцию: ХС+Ацил-КоАàЭфирХС+ +КоА-SН

2. катализирует реакцию:

ХС+фосфатидилхолин -> ->Эфир ХС+лизофосфатидилхолин

3. переносит эфиры ХС с ЛПВП на хиломикроны

4. активирует «обратный» транспорт ХС из периферических тканей в печень

3.2. Липотропными факторами являются….

1. витамин В₄

2. инозит

3. метионин

4. эссенциальные жирные кислоты

Задание 4. Определите правильность утверждений и наличие причинной связи между ними.

4.1. Отсутствие в пище метионина приводит к жировой инфильтрации печени, потому что метионин является донором подвижных метильных групп.

4.2. Гипотиреоз сопровождается гиперхолестеринемией, потому что тиреоидные гормоны ингибируют активность 7- холестеролгидроксилазы.

Примеры ситуационных задач

Задача 1.

Потребление жира рыб северных морей рекомендуется больным с гиперхолестеринемией и повышенным риском тромбообразования. Объясните действие такой диеты.

Задача 2.

Каковы различия в обмене холестерина у вегетарианцев и людей, рационы которых включает много мяса, молока, яиц?

Для ответа:

А. напишите схему синтеза холестерина

Б. напишите схему регуляции холестерина

В. объясните происхождение субстратов для синтеза холестерола.

Г. Объясните какова роль ЛПОНП, ЛПНП, и ЛПВП в транспорте холестерола.

 

Самостоятельная работа студентов

Занесите в тетрадь протоколы лабораторных работ, оставляя место для расчетов и выводов.

Работа 1. Количественное определение содержания лецитина

В сыворотке крови.

 

Содержание лецитина в сыворотке крови здорового человека зависит от возраста, составляя в среднем 1,5-2,7 г/л. Изменение содержания лецитина в крови наблюдается при ряде заболеваний (атеросклероз, сахарный диабет, микседема и др.).

Принцип метода

Лецитин извлекается из сыворотки крови горячим спиртом; после минерализации в экстракте колориметрическим методом определяется неорганический фосфор, содержащийся в составе лецитинов. Количество лецитина определяется по стандартной кривой.

Ход работы

В пробирку налить 1 мл сыворотки крови и 2,5 мл спирта. Содержимое пробирки перемешать стеклянной палочкой. Пробирку неплотно закрыть резиновой пробкой и поместить на 10 минут в водяную баню при температуре 80°С. Параллельно поставить контрольную пробу с 2,5 мл смеси Блюра. Содержимое обеих пробирок охладить, профильтровать через обезжиренный фильтр в сухие пробирки. Для полноты извлечения содержимое пробирки сполоснуть 1-1,5 мл смеси Блюра и вылить на фильтр.

Полученные фильтраты (опыт и контроль) осторожно выпарить, добавить в каждую пробирку по 5 капель концентрированной серной кислоты и сжечь на слабом пламени спиртовки до появления бурой окраски и тяжелых белых паров. Пробирки охладить на воздухе, добавить по 5-6 капель пергидроля и содержимое пробирок вновь сжечь до обесцвечивания жидкости. После охлаждения в каждую пробирку добавить по 2 мл бидистиллированной воды, нейтрализовать содержимое пробирок 6-7 каплями 33% раствора едкого натра, после чего добавить по 2,5 мл ацетатного буфера (рН - 4,0), 0,5 мл 2% раствора молибденово-кислого аммония и 1 мл 1% раствора аскорбиновой кислоты. Содержимое пробирок тщательно перемешать и через 10 минут колориметрировать па ФЭКе с красным светофильтром (опыт против контроля). Содержание лецитина в сыворотке крови в г/л рассчитать по калибровочному графику.

 

Работа 2. Количественное определение холестерина

В сыворотке крови по методу Илька.

Принцип метода

Холестерин, содержащийся в сыворотке крови, обрабатывается реактивом Либермана-Бурхарда (смесь уксусного ангидрида, ледяной уксусной кислоты и концентрированной Н₂SО₄). При этом холестерин теряет воду и превращается в непредельный углеводород, который с уксусным ангидридом образует зеленое окрашивание. Интенсивность полученной окраски определяется на ФЭКе.

Ход работы

В сухую (!) пробирку поместить 2,1 мл реактива Либермана-Бурхарда и осторожно по стенке пробирки добавить 0,1 мл негемолизированной сыворотки крови. Пробирку тотчас же встряхнуть энергичными движениями 8-10 раз и поместить в термостат при температуре 30°С на 20-25 минут в темноте. Полученную зеленую окраску колориметрировать на ФЭКе при красном светофильтре против дистиллированной воды в кюветах с толщиной слоя 5 мм.

По найденной экстинции определить количество холестерина в г/л по стандартной кривой.

Содержание холестерина в сыворотке крови у человека зависит от возраста. В сыворотке крови здорового взрослого человека содержится 1,5-2,4 г/л холестерина, у детей - 1,0-1,3 г/л, юношей - 1,3-1,8 г/л, у людей пожилого возраста выше 2,4 г/л. Обмен холестерина часто нарушается при различных заболеваниях (атеросклероз, гипертоническая болезнь и др.).

Эталоны ответов к тестовым заданиям.

1.1. – Б

1.2. – В

2.1. – 1-Б,В,Г, Д; 2-Д; 3-А

2.2. – 1-А; 3-Б; 2-В; 4-Г

3.1. – 2, 4

3.2. – 1, 2, 3

4.1. – В (+ + -)

4.2. – С (+ - -)