Выделение культур бордетелл и изучение их биологических свойств

 

В процессе проводимых исследований вопросу изоляции бордетелл и изучению их свойств уделяли большое внимание, так как результаты этих исследований служили для оценки роли бордетелл в возникновении пневмоний у свиней в данном хозяйстве и установлении окончательного диагноза.

В результате бактериологического исследования 19 проб патологического материала от поросят больных пневмониями культура Bordetella bronchiseptica выделена в 6 случаях, что составило 31,5%.

Культурально-морфологические свойства

Все выделенные штаммы бордетелл в МПБ в первые сутки давали легкое помутнение среды, при более длительном культивировании (4-5 суток) образовывали пристеночное кольцо, а на дне пробирки - осадок, поднимающийся при встряхивании в виде “косички”.

На МПА через 24 часа отмечали росинчатые полупрозрачные, блестящие колонии величиной с булавочную головку. Через 48-72 часа эти колонии приобретали серо-белый цвет. На казеиново-угольном агаре наблюдали аналогичный рост. На кровяном агаре зона гемолиза проявлялась через 48 часов, но четкие результаты были выявлены лишь после дополнительного 24 часового выдерживания при комнатной температуре.

В мазках-отпечатках из органов, окрашенных по Граму, выявили грамотрицательные короткие палочковидные бактерии с закругленными концами, капсулоподобной структуры, теряющейся при пассировании на питательные среды.

В мазках, приготовленных из бульонных и агаровых культур, выделенные штаммы имели вид грамотрицательных палочек с закругленными концами, размером 0,4-0,6 х 1,5-2,5 мкм, или грамотрицательных коккобактерий, расположенных одиночно или попарно, не образующих спор, относящиеся к подвижным микроорганизмам.

Биохимические свойства

При изучении биохимических свойств (табл. 5.3.1.) установили, что выделенные культуры бордетелл не расщепляли углеводы и многоатомные спирты, не образовывали индол и сероводород. При этом характерной была положительная реакция на уреазу. Наряду с этим полученные нами культуры редуцировали нитраты, образовывали аммиак.

 

Таблица 5.3.1 Биохимические свойства выделенных бордетелл

Штаммы	Тесты
	глюкоза	Сахароза	мальтоза	маннит	дульцит	глицерин	индол	Н2S	NH3	уреаза	редукция нитратов
Л2	-	-	-	-	-	-	-	-	+	+	+
Л4	-	-	-	-	-	-	-	-	+	+	+
Л5	-	-	-	-	-	-	-	-	+	+	+
Л9	-	-	-	-	-	-	-	-	+	+	+
Л15	-	-	-	-	-	-	-	-	+	+	+
Л18	-	-	-	-	-	-	-	-	+	+	+

 

Обобщая результаты проведенных исследований по изучению биологических свойств выделенных изолятов, сравнивая их с референтным штаммом Bordetella bronchiseptica, полученным из Польши и сопоставляя их с литературными данными, можно с уверенностью сказать, что выделенные нами микроорганизмы принадлежат к роду Bordetella.

Вывод. При исследовании 19 проб патологического материала в 6 (31,5%) случаях выделены микроорганизмы, которые на основе культурально-морфологических, тинкториальных и биохимических свойств отнесены к B. bronchiseptica.

Серологическая диагностика

 

Наряду с использованием других методов, основным показателем в выяснении этиологии и ретроспективной диагностики бордетеллезной пневмонии свиней является серологический метод исследования. Реакция агглютинации представилась нам достаточно достоверной и доступной.

Мы провели исследования в РА с бордетеллезным антигеном сывороток крови животных различных возрастных групп. Результаты этих исследований представлены в таблице 5.4.1.

 

Таблица 5.4.1 Результаты исследования сывороток крови свиней различных возрастов в РА на бордетеллез

Возраст животных (мес.)	Количество исслед. животных	Положительно реагировавшие
		количество	%	всего, %
0 - 2 2 - 4 4 - 6 10 - 12	12 12 10 10	4 6 3 1	33,3 50 30 10	31,8

 

Из данных таблице 5.4.1. следует, что при исследовании в РА 44 проб сыворотки крови, в 14 (31,8%) были выявлены диагностические титры антител к бордетеллезному антигену.

При анализе результатов исследования проб сывороток крови животных разных возрастных групп антитела к бордетеллам в диагностических титрах у поросят до 2-х месячного возраста выявили у 4-33,3% от количества исследованных животных данного возраста. У поросят 2-4 месячного возраста процент реагирующих был выше и составил 50%. У подсвинков 4-6 месяцев процент реагирующих снизился и составил 30%. Процент реагировавших взрослых свиней доходил до 10%. Максимальные титры 1:320 обнаруживали у поросят 2 - 4-месячного возраста. Исходя из этого можно предполагать, что с возрастом число реагирующих животных с бордетеллезным антигеном уменьшается и регистрируется у взрослого поголовья в единичных случаях, несмотря на неблагополучие хозяйства и высокий процент реагирующих среди поголовья в возрасте до 6 месяцев.