Тема: Патогенные трепонемы, боррелии и лептоспиры. Лабораторная диагностика сифилиса, боррелиозов, лептоспироза.

СРС: Риккетсии эпидемического и эндемического сыпного тифа. Лабораторная диагностика риккетсиозов.

Вопросы для обсуждения:

1. Особенности строения спирохет.
2. Факторы патогенности T. pallidum, патогенез и клинические проявления сифилиса.
3. Микроскопический метод диагностики сифилиса.
4. Неспецифические реакции с кардиолипиновым антигеном (реакции Вассермана, микропреципитации (флоккуляции) на стекле).
5. Специфические реакции с применением в качестве антигена живых или разрушенных ультразвуком тканевых бледных трепонем (РИТ, ИФА, непрямая РИФ, РПГА).
6. Возбудители болезни Лайма: В. burgdorferi, B. garini, B. afzelii, их факторы патогенности и патогенез заболевания.
7. Методы лабораторной диагностики боррелиозов.
8. Характеристика лептоспир.
9. Факторы патогенности L. intrerrogans и патогенез лептоспироза.
10. Лабораторная диагностика лептоспироза.
11. Препараты для лечения и профилактики сифилиса, возвратного тифа и лептоспироза.

 

Практические задания:

1. Микроскопировать обработанный колларголом препарат, приготовленный из отделяемого твердого шанкра, и зарисовать.

Рис. 1. Тreponema pallidum в препарате из отделяемого твердого шанкра

 

2. Произвести учет результата реакции Вассермана и зарисовать.

 

								1-ая сыворотка крови больного
1: 20	1: 40	1: 80	1: 160	1: 320		К1	К2
								2-ая сыворотка крови больного

Вывод: ___________________________________________________________

 

3. Изучить схему постановки реакции иммобилизации бледных трепонем (РИБТ).

Культура трепонем + исследуемая сыворотка

Результат:____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

 

4. Перечислить факторы патогенности Тreponema pallidum: ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

5. Дополнить схему лабораторной диагностики сифилиса.

Исследуемый

материал:

________________________ метод	_________________________ метод
			Неспецифические реакция с кардиолипиновым антигеном:
	реакция ……………
____________________метод   ПЦР	Реакция микропреципитации (флоккуляции) на стекле
	Специфические реакции с живыми тканевыми бледными трепонемами или антигеном, полученным из них
	___________________________________ ___________________________________ ___________________________________
Указать, какие методы исследования применяют при диагностике сифилиса в различные стадии болезни: ______________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________

 

6. Изучить морфологию лептоспир в окрашенном по Романовскому-Гимзе препарате и в препарате «раздавленной капли» в темном поле. Окрашенный препарат зарисовать.

Рис. 3. Leptospira intrerrogans. Окраска по Романовскому-Гимзе

 

 

7. Перечислить факторы патогенности Leptospira intrerrogans: ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

8. Дополнить схему лабораторной диагностики лептоспироза.

 

Исследуемый материал: _____________метод ____________метод ___________ _________       t=28º-30º C в атмосфере СО2 метод метод       Среда____________ Биопроба ПЦР _________________     Через 10 дней культивирования         t=28º-30º C в атмосфере СО2 через 7-10 дней культивирования   _______________метод     Идентификация:   Реакция агглютинации-лизиса   Биохимические свойства 37ºС 1 час Сыворотка больного+живые лептоспиры   Антигенные свойства

9. Зарисовать окрашенный по Романовскому-Гимзе препарат «толстой капли» крови с возбудителем возвратного тифа.

 

Рис. 2. Боррелии возвратного тифа в «толстой капле» крови. Окраска по Романовскому-Гимзе

 

 

10. Перечислить факторы патогенности боррелий: ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

11. Дополнить схему лабораторной диагностики боррелиозов.

 

Исследуемый

материал: __________________метод   метод   Биопроба   метод             РСК Окраска по ………………………. Через 5 дней мазок из крови РНИФ …………………………………… ИФА   __________________метод ПЦР         Окраска по

12. Ознакомиться с препаратами для диагностики сифилиса, боррелиозов, лептоспироза (кардиолипиновый антиген, сухой комплемент, антигены из боррелий, лептоспирозные диагностические сыворотки, тест-системы для постановки ИФА, праймеры к специфическим генам возбудителей для постановки ПЦР).

 

13. Изучить препараты, применяемые для специфической профилактики и терапии лептоспироза (лептоспирозная вакцина, противолептоспирозный иммуноглобулин), и дать им характеристику:

Противолептоспирозный иммуноглобулин ____________________________________

______________________________________________________________________

______________________________________________________________________

 

Лептоспирозная вакцина __________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

СРС: Риккетсии эпидемического и эндемического сыпного тифа. Лабораторная диагностика риккетсиозов.

1. Характеристика свойств R. prowazekii и R.typhi – возбудителей эпидемического и эндемического сыпного тифа, механизм заражения человека. 2. Факторы патогенности риккетсий Провачека, патогенез эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля- Цинссера. 3. Лабораторная диагностика эпидемического и эндемического сыпного тифа.

Темы рефератов:

1. Таксономическое положение риккетсий в домене «Bactеria», их морфологические, культуральные и биохимические свойства.

2. Факторы патогенности R. prowazekii, патогенез эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля- Цинссера.

 

Подпись преподавателя ___________________

Дата__________________

Занятие 7

 

Тема: Патогенные клостридии. Лабораторная диагностика ботулизма.

СРС: Анаэробные бактерии, не образующие споры (Bacteroides, Porphyromonas, Prevоtella), их роль в патологии.

Вопросы для обсуждения:

1. Общая характеристика патогенных клостридий.

2. Механизм молекулярного действия тетаноспазмина и клинические проявления столбняка.

3. Специфическая терапия и специфическая профилактика столбняка.

4. Механизм молекулярного действия ботулотоксина. Патогенез и клинические проявления ботулизма.

5. Лабораторная диагностика ботулизма. Определение типа токсина клостридий ботулизма.

6. Специфическая терапия ботулизма и его профилактика.

7. Клостридии анаэробной раневой инфекции (травматического клостридиоза): виды, характеристика. Факторы патогенности клостридий и патогенез травматического клостридиоза.

8. Специфическая терапия и методы профилактики травматического клостридиоза.

9. Роль Clostridium perfringens в возникновении пищевой токсикоинфекции. Характеристика его энтеротоксина.

10. Clostridium difficile – возбудитель псевдомембранозного энтероколита.

 

Практические задания:

1. Учесть наличие роста анаэробных бактерий в среде Китта-Тароцци.

 

1.

2.

после посева пробирка прогрета на водяной бане при 80^оС втечение 25 мин

 

2. Промикроскопировать приготовленные и окрашенные по Граму и Пешкову мазки из культуры анаэробных бактерий в среде Китта-Тароцци. Препараты зарисовать.

 

Рис. 1. Препарат-мазок из культуры анаэробных бактерий в среде Китта –Тароцци. Окраска по Граму

 

Рис. 2. Препарат-мазок из культуры анаэробных бактерий в среде Китта –Тароцци. Окраска по Пешкову

 

3. Пересеять культуру бактерий со среды Китта-Тароцци в высокие столбики с сахарным МПА методом последовательных разведений для получения изолированных колоний.

4. Изучить культуральные свойства клостридий в столбиках с сахарным агаром и в среде Вильсон-Блера.

 

 

5. Произвести учет ферментативных свойств клостридий в средах «пестрого ряда» и сопоставить их с дифференциально-диагностическими признаками, указанными в таблице.

Таблица