Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Прямая и непрямая реакция Кумбса
Тест Кумбса бывает непрямой и прямой, в зависимости от этого он производится в один либо же два этапа. В ходе осуществления прямой реакции Кумбса – с условием, что антитела уже закреплены на поверхности эритроцитов – антиглобулиновая сыворотка добавляется к сыворотке исследуемой крови, и осуществляется агглютинация эритроцитов. В случае, когда в плазме крови антитела находятся в свободном состоянии проводится непрямой тест Кумбса. На первом этапе надо зафиксировать антитела на поверхности эритроцитов, для этого нужна инкубация эритроцитов и сыворотки крови. Потом добавляется антиглобулиновая сыворотка. Неполные антитела в отличии от нормальных моновалентны, поскольку они имеют один активный центр, способный взаимодействовать только с одним эпитопом: в то время как другие эпитопы остаются не связанными. В результате этого не происходит образования крупных комплексов, выпадающих в осадок в растворе электролита. Последние проявляются только в реакциях с бивалентными АТ. Для исправления этого положения вводится антиглобулиновая сыворотка (АГС), содержащая бивалентные АТ к глобулину, которая свяжет между собой моновалентные АТ. Содержащиеся в исследуемом материале. Таким образом произойдет визуально видимая гемагглютинации или агглютинация, свидетельствующая о наличии в исследуемой сыворотке неполных (моновалентных) антител. Например, в случае беременности резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом у нее в сыворотке крови появятся неполные антитела. Для их выявления в пробирку с исследуемой сывороткой крови вносят резус- положительные эритроциты, а затем АГС. Появление гемагглютинации свидетельствует о положительной реакции. ВОПРС 28 В качестве метки используются светящиеся флюорохром-ные красители (изотиоционат флюорисцеина и др.).Существуют различные модификации РИФ. Для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний — для выявления микробов или их антигенов в исследуемом материале применяется РИФ по Кунсу. Выделяют два метода РИФ по Кунсу: прямой и непрямой. Компоненты прямой РИФ:
Компоненты непрямой РИФ: Мазок из исследуемого материала сначала обрабатывают иммунной сывороткой к искомому антигену, а затем — меченой антиглобулиновой сывороткой. Светящиеся комплексы АГ-АТ — меченые АТ обнаруживаются при помощи люминесцентного микроскопа. Также выделяют 4-компонентную разновидность непрямой РИФ, когда дополнительно вводится комплемент (сыворотка морской свинки). При положительной реакции образуется комплекс АГ-АТ — меченые — АТ-комплемент.
ВОПРОС 29(КОА) Этот тип иммунологической реакции основан на способности специфических антител — антитоксинов подавлять биологическую активность экзотоксинов бактерий. Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой in vitro Реакция применяется:
Реакция нейтрализации на животных применяется: Титрование антитоксических сывороток по известной смертельной (опытной) дозе токсина. Проводится в 2 этапа: ВОПРОС 30 Реакция флоккуляции(РФ) – ПРИМЕНЕНИЕ: используется для титрования антитоксических сывороток, токсинов и анатоксинов. В реакции флоккуляции в качестве антигена участвует токсин или анатоксин. При смешивании их в эквивалентных соотношениях с антитоксической сывороткой появляется помутнение, а затем рыхлый осадок. Механизм РФ сходен с таковым реакции преципитации. В реакциях флоккуляции участвуют в качестве компонентов токсины, анатоксины, антитоксины (антитоксические сыворотки). Необходимым условием флокуляции является адсорбция одной макромолекулы или ассоциата макромолекул на нескольких частицах и образованием хлопьев, состоящих из частиц, связанных полимерными мостиками. Реакция состоит в том, что при смешении токсина с соответствующей иммунной сывороткой происходит помутнение в ряде пробирок. Сначала в одной из них, а затем и в других ближайших к ней выпадает хлопьевидный осадок (флокулят). Этот ряд давших помутнение и осадок пробирок называется «зоной флокуляции», а пробирка, в к-рой раньше других выпал флокулят, называется пробиркой «инициальной» флокуляции. Выпадение осадка происходит при условии полной нейтрализации токсина антитоксином. Инициальная Ф. обычно соответствует той предельной дозе антитоксической сыворотки, к-рая еще способна обезвредить данное количество токсина. Поэтому по инициальной Ф. можно вычислить антитоксический титр сыворотки. С другой стороны, зная сколько антитоксических единиц содержится во взятой дозе сыворотки, можно по инициальной Ф. определить и антигенную силу токсина.
ВОПРОС 33 Теория иммунитета Эрлиха — одна из первых теорий антителообразования, согласно которой у клеток имеются антигенспецифические рецепторы, высвобождающиеся в качестве антител под действием антигена.
Ерне выдвинул вариант селективной теории. По его представлениям, в организме постоянно присутствуют антитела самой разнообразной специфичности. Антитело после взаимодействия с соответствующим антигеном поглощается фагоцитирующими мононуклеарами, что приводит к активной продукции этими клетками антител исходной специфичности. Особое место в иммунологии занимает клонально-селекционная теория иммунитета М.Бернета. Он использовал представления П.Эрлиха и Н. Ерне о предсуществовании антител разной специфичности, но указал на то, что каждое специфическое антитело синтезируется отдельным клоном клеток. По М.Бернету, при дифференцировке лимфоцитов от стволовой кроветворной клетки и при параллельном процессе мутационных изменений в генах, контролирующих синтез специфических антител, возникают клоны клеток, которые способны взаимодействовать только с антигеном соответствующей специфичности. В результате такого взаимодействия формируется отобраный по специфичности клон, который либо секретирует антитела заданной специфичности, либо обеспечивает строго специфическую клеточную реакцию. ВОПРОС 31 Иммуноферментный анализ В настоящее время иммуноферментный анализ (ИФА) является наиболее широко распространенным иммунологическим методом • антитела или антигены фиксируются на внутренней поверхности полистироловых планшетов для иммунологических реакций; • в качестве метки используется фермент • реакция учитывается визуально, после добавления в лунку субстрата для данного фермента. Метод ИФА с использованием индикаторных полосок (иммунохроматография) широко используется в развитых странах для самотестирования. Поверхность индикаторной полоски покрыта антителами против выявляемого антигена. Вместе с антителами на твердой фазе иммобилизованы молекулы фермента глюкозооксидазы. Готовую полоску погружают в исследуемый образец. Антитела связывают молекулы антигена из пробы. Степень заполнения вакантных антител
пропорциональна концентрации антигена. Затем индикаторную полоску переносят в раствор, содержащий конъюгат стандартного антигена с пероксидазой, субстрат для глюкозооксидазы Регистрацию проводят визуально Анализируемый материал (сыворотки, слюна, моча) не требует предварительного разведения и дополнительной обработки. Иммуноферментный анализ или метод – выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой. После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат-хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции – интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В и др., а также определения гормонов, ферментов, По сравнению с ранее описанными методами ИФА обладает существенными преимуществами: ❖ высокой чувствительностью, позволяющей выявлять до 0,05 нг/мл антигенного материала; ❖ высокой специфичностью за счёт использования моноклональных антител, взаимодействующих со строго определёнными эпитопами анализируемых антигенов; ❖ автоматизацией всех этапов проведения исследования. Иммуноферментный анализ (ИФА). Определение неизвестных антител включает в себя следующие этапы: 1) связывание известного антигена с пластиком лунки планшета; 2) внесение испытуемой сыворотки; 3) внесение конъюгата (меченой ферментом антиглобулиновой сыворотки); 4) внесение хромогенного субстрата. Определение неизвестных антигенов состоит из таких этапов: 1) связывание антител, специфичных для искомого антигена, с пластиком лунки планшета; 2) внесение антигенсодержащего материала; 3) внесение 2-х антител той же специфичности; 4) внесение конъюгата (меченой ферментом антиглобулиновой сыворотки); 5) внесение хромогенного субстрата.
ВОПРОС 34 Иммунологическая толерантность — явление, противоположное иммунному ответу и иммунологической памяти. Проявляется она отсутствием специфического продуктивного иммунного ответа организма на антиген в связи с неспособностью его распознавания. Иммунологическая толерантность бывает врожденной и приобретенной. Примером врожденной толерантности является отсутствие реакции иммунной системы на свои собственные антигены. Приобретенную толерантность можно создать, вводя в организм вещества, подавляющие иммунитет (иммунодепрессанты), или же путем введения антигена в эмбриональном периоде или в первые дни после рождения индивидуума. Приобретенная толерантность может быть активной и пассивной. Активная толерантность создается путем введения в организм толерогена, который формирует специфическую толерантность. Пассивную толерантность можно вызвать веществами, тормозящими биосинтетическую или пролиферативную активность иммунокомпетентных клеток (антилимфоцитарная сыворотка, цитостатики и пр.).
ВОПРОС 35 Иммунологическая память. Вопрос 37 37. Препараты, содержащие антитела (антитоксические, анти- микробные сыворотки, гамма-глобулины и иммуноглобули- ны), их характеристика, получение, титрование. Серотерапия и серопрофилактика. Анатоксины – экзотоксин, обезвреж. формалином и выдержан.при t=37° 1 мес., не ядовит, но иммуногенен, очищ. от балластных б-ков, адсорбируют на Al(OH)3. Искус.актив. антитоксич. им-т. АКДС – убит.б. коклюша + дифтерий. и столбняч. анатоксины. Для проф-ки. Антитоксические сыворотки содержат антитела против экзотоксинов. Их получают путем гипериммунизации животных (лошадей) анатоксином. Активность таких сывороток измеряется в АЕ (антитоксических единицах) или ME (международных единицах) — это минимальное количество сыворотки, способное нейтрализовать определенное количество (обычно 100 DLM) токсина для животных определенного вида и определенной массы. В настоящее время в России антитоксические сыворотки: • противодифтерийная; • противостолбнячная; широко используются следующие • противогангренозная; • противоботулиническая. Применение антитоксических сывороток при лечении соответствующих инфекций обязательно. 3. Антимикробные сыворотки содержат антитела против клеточных антигенов возбудителя. Их получают иммунизацией животных клетками соответствующих возбудителей и дозируют в миллилитрах. Антимикробные сыворотки могут применяться при лечении: • сибирской язвы; • чумы; • стрептококковых инфекций; • стафилококковой инфекции; • синегнойной инфекции. Их назначение определяется тяжестью течения заболевания и, в отличие от антитоксических, не является обязательным. Препараты Ig(имуноглобулины) – содерж. только Ат без др. б-ков. 95% IgG и 5% IgM. Готовят из сывороток осаждением Ig. Гомологич. – из крови людей (грипп, столб., коклюш, HBV), гетерологич. – кровь имм. лошадей (клещ.энц, бешен.). Проф-ка и лечение.Из выделяемой фракции глобулинов получают иммунологически активные препараты: гамма-глобулин и полиглобулин. Препараты иммуноглобулинов представляют собой концентраты антител - продуктов иммунного обмена, опсонизирующая, нейтрализующая и комплементсвязывающая активность которых является основным фактором их клинической эффективности Иммуноглобулины-антитела распознают и связывают антигены. В результате связывания они могут немедленно нейтрализовывать токсины, превращать антигены в крупные агрегаты, способствовать поглощению микробных, различных чужеродных клеток и агрегатов фагоцитами. В фагоцитах иммунные комплексы и клетки разрушаются гидролитическими и другими ферментами. Одновременно изменение в молекулах иммуноглобулинов приводит к запуску параллельных механизмов защиты, таких как активация комплемента и др. Готовят иммуноглобулины из крови с высоким титром антител: крови людей, перенесших данную инфекцию, крови специально иммунизированных доноров
Интерфероны как ф-рыпртивовирим-та: ИФ были открыты как противовирагенты.Сущ 3 разновидности:альфа,бета,относимые к первому классу,и гамма(2класс).Альфа продуцируется лейкоцитами.обладпротивовир,антипролиферативным и противоопухолевым действием.Бетта образ фибробластами,обладпротивооп,а также антивирдействием.Гамма-продукт Т-хелперных,а также СД8 Тл-именуется лимфоцитарным и иммунным.Облад иммуномодулирующим и слабым противовирусным эффектом.Продукцию ИФ 1 класса индуцируют вирусы и препараты двунитчатойДНК,продукцию гамма-Ag и митогенныепреп-ты.Потивовир эффект обусловлен спос-ю активировать в кл синтез ингибиторов и ферм-в,блокирующих репликацию вирусной ДНК и РНК,что приводит к подавлению репродукции вируса.Для усиления противовир защиты исп ср-ва,повышающие продукцию собственного ИФ-интерфероногены.В качестве индукторов эндогенного ИФ применяют противовирвакцины,преп-ты РНК и ДНК. По получению: лейкоцитарный чкловеческий.Получ из лейк-в и лимф-в,форма выпуска сухой порошок,развод кипяченой водой и вводят интраназальною.Рекомбинантныйифн-гены из лимф,м/ф,лейк-в вырезают, присоединяют к дефектным фагам,ихисп как вектор.Мвып в форме свечей:роферон, реоферон.Данные препараты эффективнее.
|
|||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2017-01-19; просмотров: 623; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.133.134.66 (0.056 с.) |