Способы обездвиживания лягушки

Для многих работ практикума по физиологии необходимо обездвижить лягушку. Сделать это можно одним из следующих способов. Разрушьте головной и спинной мозг лягушки двумя описанными ниже способами: сначала первым, а затем вторым (неважно, что мозг уже разрушен - важно научиться делать пере резки на нужном уровне и научиться вставлять иглу в спинномозговой канал).

Разрушение головного и спинного мозга. Возьмите лягушку в левую руку спиной вверх, так чтобы большой палец лежал на ее спине. Указательный палец положите на верхнюю челюсть лягушки и наклоните ее голову вниз. В таком положении хорошо видно место расположения затылочной ямки. Через ямку между затылочной костью и позвоночником введите препаровальную иглу в спинномозговой канал и разрушьте спинной мозг несколькими поворотами иглы. Затем иглу поверните в противоположном направлении, введите ее в полость черепа и разрушьте головной мозг. Общее расслабление мышц лягушки и отсутствие у нее рефлекторных реакций свидетельствуют о полном разрушении головного и спинного мозга. При этом способе обездвиживания лягушки теряется очень мало крови

Декапитация с последующим разрушением спинного мозга. Возьмите лягушку в левую руку, а правой введите как можно глубже нижнее лезвие ножниц в рот под заднюю часть верхней челюсти. Быстрым движением отрежьте верхнюю челюсть на уровне заднего конца барабанных перепонок (нижнюю челюсть сохраните). В отверстие спинномозгового канала введите препаровальную иглу и разрушьте спинной мозг.

Применение наркоза (эфира, спирта, уретана). Наркоз в учебном практикуме используется редко. Для наркотизации лягушки применяется 10%-ный раствор спирта или 2%-ный раствор эфира. Лягушку опускают в раствор на 10-15 мин. Расслабление мускулатуры и отсутствие двигательной активности - хорошие показатели достаточного действия наркоза. Уретан вводится под кожу. Для наркотизации лягушки достаточно 1 мл 5%-ного раствора уретана, его действие наступает через 15-20 мин.

 

           Следует помнить, что физиологические работы связаны с использованием: электрических приборов с опасным для жизни напряжением, растворов кислот и щелочей способных вызвать травму при попадании на кожу, слизистые или внутрь, легковоспламеняющихся жидкостей, возгорание которых может привести к пожару. Все это требует неукоснительного соблюдения принятых в лаборатории правил техники безопасности   

 

Классические экспериментальные работы по физиологии возбуждения проводятся на нервно-мышечном препарате лягушки, поэтому первое занятие по этой теме посвящается методике и технике его приготовления.

 

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 3. Приготовление нервно-мышечного препарата лягушки

 

Прежде чем приступить к этой работе, необходимо обездвижить лягушку. Нервно-мышечный препарат состоит из икроножной мышцы, бедренной косточки и седалищного нерва с кусочком позвоночника.

 

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: лягушка, набор инструментов для препарирования, раствор Рингера, вата.

М е т о д и к а в ы п о л н е н и я р а б о т ы..

Разрушьте головной и спинной мозг лягушки. Возьмите левой рукой лягушку за бедра, перережьте позвоночник на 1 - 1,5 см выше места прикрепления тазовых костей. Свисающую переднюю часть туловища и внутренности удалите. Держа остаток позвоночника левой рукой, захватите кожу и снимите ее с лапок. Лапки залейте раствором Рингера. Осторожно вырежьте копчиковую кость и разделите его на две половины. Для этого перережьте вдоль сначала кусочек позвоночника, а затем - лобковое сочленение. Другую лапку положите на спинную сторону и отделите ножницами подвздошную кость. Захватив пинцетом кусочек позвоночника, отведите в сторону нерв и удалите подвздошную кость. При помощи двух пинцетов раздвиньте мышцы на спинной стороне поверхности бедра по средней линии.Осторожно, не касаясь пинцетом и ножницами нерва, отделите его от окружающих тканей вдоль всего бедра. Нерв отведите в сторону и удалите все мышцы с бедренной кости. На голени отделите от кости икроножную мышцу, подрезав ахиллово сухожилие, и привяжите к нему нитку. Голень и лапку отрежьте ниже колена. Препарат положите в раствор Рингера. Для закрепления навыков в приготовлении препарата можно его приготовить и из другой лапки, оставленной в качестве запасной.

Для лучшей сохранности препарата желательно 1 - 2 раза менять раствор Рингера как на тарелочке, где идет его приготовление, так и в стаканчике с запасной лапкой.

 

Запишите и зарисуйте в тетради основные этапы приготовления нервно-мышечного препарата.

Укажите физиологическое значение каждой части нервно-мышечного препарата.

 

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 4. Наблюдение биоэлектрических явлений

 

Впервые биоэлектрические явления в живых тканях наблюдал итальянский физиолог Луиджи Гальвани.

Луиджи Гальвани в 1786 г. при изучении влияния атмосферного электричества на живой организм размещал на железной решетке балкона задние лапки лягушки, закрепленные на медных крючках. При соприкосновении лапок с железной решеткой балкона наблюдалось сокращение мышц. На основании этих наблюдений Гальвани высказал мысль о существовании «животного электричества». Но Вольта доказал, что в этом опыте причиной сокращения лапок лягушки был ток, возникающий между двумя разными металлами.

В настоящее время опыт, в котором сокращение мышцы возникает при прикосновении к ней или к иннервирующему ее нерву пинцетом, состоящим из двух разнородных металлов, получил название первого опыта Гальвани.

Второй опыт Гальвани проделал в 1794 г. без металлов. Приподнимая нерв нервно-мышечного препарата стеклянным крючком, он набрасывал его на поврежденный участок мышцы и наблюдал ее сокращение. Так было доказано наличие «животного электричества» - тока покоя. Позднее Матеуччи представил другие доказательства наличия биопотенциалов в эксперименте, получившем название опыта вторичного сокращения или опыта Матеуччи.

Более изящным вариантом опыта Матеуччи является опыт Келликера с набрасыванием нерва на работающее сердце..

Проделайте опыты Гальвани и Матеуччи и Келликера.

 

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: стимулятор, электроды, лягушка, набор инструментов для препарирования, стеклянный крючок.

 

М е т о д и к а в ы п о л н е н и я р а б о т ы.

Первый опыт Гальвани.

Приготовьте креоскопический препарат, состоящий из нижней части позвоночника и соединенных с ней лапок. Рассмотрите нервные корешки, идущие с двух сторон вдоль копчика и образующие на бедре седалищный нерв. Подведите под оба пучка нервов одну браншу гальванического пинцета, а другой браншей прикасайтесь к нервам сверху. Наблюдайте сокращение лапок.

Объясните причину возникновения сокращения.

 

Второй опыт Гальвани.

Приготовьте новый нервно-мышечный препарат. Слегка поранив мышцу около ахиллова сухожилия, с помощью стеклянного крючка быстро набросьте нерв препарата на пораненный участок мышцы, наблюдайте ее сокращение.

Объясните причину возникновения сокращения.