Изолирование лекарственных и наркотических веществ амфифильными растворителями

Амфифильные растворители (метанол, этанол, ацетонитрил, ацетон) имеют сродство к гидрофильным и гидрофобным участкам мембран клеток, а поэтому способны легко проникать внутрь клеток и извлекать лекарственные и наркотические вещества. Известно, что в ионизированной форме (при рН=2) лекарственные и наркотические вещества извлекаются полярными растворителями – водой и спиртом, в молекулярной (неионизированной) форме – липофильными (неполярными) растворителями. С помощью амфифильных растворителей лекарственные и наркотические вещества способны извлекаться как в ионизированной, так и неионизированной форме. При изолировании не обязательно подкислять или подщелачивать объект.

Изолирование подкисленным спиртом

Метод Стаса-Отто

Метод предложен в 1851 г. бельгийским химиком Ж.С. Стасом для изолирования никотина из внутренних органов трупа. В 1856 г. Юлий и Роберт Отто ввели в этот метод очистку от примесей с помощью органических растворителей. В настоящее время он известен как метод Стаса-Отто. На протяжении многих десятилетий этот метод подвергался различным модификациям с учетом факторов, влияющих на изолирование ядовитых веществ. В настоящее время метод применим для выделения не только алкалоидов, но и веществ кислотного, слабоосновного характера, в том числе синтетических лекарственных и наркотических средств.

Схема метода

1-й этап. Навеску объекта массой 100 г настаивают три раза по 24 часа с 96% этиловым спиртом, подкисленным щавелевой кислотой до рН=2,5-3,0. Спиртовые вытяжки упаривают при 40⁰С и в полученном остатке многократно осаждают белки 96% спиртом. Очищенный остаток растворяют в 20-25 мл воды.

 

2-й этап. Водный раствор последовательно экстрагируют хлороформом при рН=2 и рН=8-10 после подщелачивания 25% раствором аммиака. В экстракт при рН=2 переходят вещества кислотного и слабоосновного характера. В экстракт при рН=8-10 переходят вещества основного характера.

Оценка метода

Достоинство метода состоит в том, что он позволяет извлекать вещества различной природы. Кроме того, этиловый спирт вызывает осаждение белков, что очень важно при работе с трупным материалом.

Недостатком метода являются его длительность выполнения и возможны потери искомых веществ за счет адсорбции их белками при осаждении и фильтровании. Однако несмотря на это и на появление новых методов изолирования, метод Стаса-Отто не теряет значения, особенно при исследовании объектов, подвергшихся сильным гнилостным изменениям.

 

Метод Е.М. Саломатина.

Экстракция подкисленным спиртом хорошо обоснована Е.М. Саломатиным при определении производных фенотиазина в биологических объектах. Обладая слабыми основными свойствами, производные фенотиазина при рН=2-3 образуют ионизированную форму, а при рН>7 – неионизированную.

 

 

Используя эти свойства, удалось выделить и очистить от примесей анализируемые соединения и их основные метаболиты - сульфоксиды.

Схема метода

1-й этап. Объект заливают 96% этиловым спиртом, подкисляют щавелевой кислотой до рН=2-3 и настаивают 3 раза по 2 ч. Спиртовые вытяжки упаривают при 40⁰С до густоты сиропа. В остатке осаждают белки 96% спиртом, фильтруют и выпаривают досуха. Очищенный остаток растворяют в 100 мл воды, нагретой до температуры 40-60⁰С, охлаждают и фильтруют.

2-й этап. Фильтрат экстрагируют дважды диэтиловым эфиром при рН=2-3. Затем водную фазу подщелачивают 50% раствором гидроксида натрия и вновь экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные эфирные вытяжки взбалтывают с 0,5 М раствором серной кислоты и полученный кислый водный реэкстракт используют для обнаружения производных фенотиазина.

Оценка метода

По данным автора, метод позволяет достичь максимальной экстракции при изолировании и уменьшить потери исследуемых веществ как при изолировании, так и при экстракции.